UZ Gent laboratoriumgids     Code of Stukje omschrijving
 
 
Hoofdmenu Labgids
  Mutatie MPL (LG-334)Verwijst naar: Mutatieanalyse van genen betrokken bij MPN en MDS/MPN overlap d.m.v. NGS
   Afdeling: Moleculaire Diagnostiek: Hematologie    Pathologie: Myeloproliferatieve aandoeningenAanvraagformulier:   Aanvraagformulier bijzondere hematologie - cytomorfologie | immunofenotypering | moleculaire analyses
StaaltypeBloed of beenmerg EDTA
Volume Beenmerg min. 1 mL, bloed 4 ml (min. 1 mL)
Uitvoering Wekelijks / Antwoordtijd = max. 25 dagen
Afnamecondities Vers afgenomen met vermelding afnametijdstip op aanvraagformulier (datum en uur)
Verzending Binnen 24h na afname
Methode Next Generation Sequencing (NGS)
Technische info
Technische informatie NGS:
- Mutatieanalyse gebaseerd op massive parallel sequencing of next generation sequencing (NGS); voor volledig panel (6 genen) zie informatie bij `Mutatieanalyse van genen betrokken bij MPN en MPN/MDS overlap mbv NGS`
- Enkel varianten met een VAF (Variant Allele Frequency) van > 5% met klinische relevantie worden gerapporteerd.  
- RefSeq (NCBI): NM_005373.2	
- Exon 10
- Codon: alle codons 
- Nucleotiden: c.1469-1566
- CoŲrdinaten (chromosomale posities) van de nucleotiden van interesse (GRCh37/hg19): 1:43814932-43815032

Uitvoering:
De library preparation, sequenering, primaire en secundaire data-analyse wordt uitgevoerd door het platform Moleculaire Diagnostiek UZ Gent (MDG) (https://www.cmgg.be/nl/zorgverlener/labguide/platform-moleculaire-diagnostiek-uz-gent-mdg) 	
Klinische info
Naast de frequente mutatie c.1849G>T (p.(Val617Phe)) in JAK2 en mutaties in CALR, komen in ~5% van de patiŽnten met essentiŽle trombocytose (ET) of primaire myelofibrose (PMF) activerende mutaties voor in de thrombopoÔetine receptor MPL. De detectie van een mutatie in MPL kan de diagnose van een ET of PMF bevestigen (diagnostisch belang). 
De meest voorkomende mutaties zorgen voor een missense mutatie in tryptofaan (Trp) 515, een aminozuur dat het MPL eiwit in een inactieve vorm houdt in de afwezigheid van een ligand. De meest frequente mutaties in MPL zijn substituties van Trp515 naar een leucine of lysine (exon 10) en worden gevonden in ~5 % van ETs en PMFs. Belangrijk hierbij is dat het verlies van het Trp, en niet het verwerven van een bepaald aminozuur, ervoor zorgt dat MPL geactiveerd wordt. Naast Trp515 zijn ook zeldzame mutaties in nucleotiden coderend voor andere aminozuren in exon 10 van MPL gerapporteerd.
MPL mutaties in ET patiŽnten zijn gecorreleerd met een slechtere prognose (kortere OS), hoger risico op trombose en grotere kans op transformatie naar een secundaire myelofibrose of AML.

Belangrijke publicaties:
-  Rumi, E., et al., Clinical effect of driver mutations of JAK2, CALR, or MPL in primary myelofibrosis. Blood, 2014. 124(7): p. 1062-9.
- Cabagnols X. et al, Presence of atypical thrombopoietin receptor (MPL) mutations in triple-negative essential thrombocythemia patients. Blood 2016. 127(3): p. 333-42.
-  Milosevic Feenstra J.D. et al, Whole-exome sequencing identifies novel MPL and JAK2 mutations in triple-negative myeloproliferative neoplasms. Blood 2016. 127(3): p. 325-32. 
-  Elala YC et ak, Calreticulin variant stratified driver mutational status and prognosis in essential thrombocythemia. Am J Hematol 2016
-  Asp J et al, Mutation status of essential thrombocythemia and primary myelofibrosis defines clinical outcome. Haematologica 2016 
Opmerkingen
Belang pre-analytische fase - stabiliteit staal: 
Aparte, ongeopende EDTA buis voor moleculaire uitwerking.
Het staal moet binnen de 2 dagen na afname verzenden worden naar het Klinische Biologie, moleculaire diagnostiek hematologie (2P8) zodat dit binnen de 3 dagen na afname in het labo kan verwerkt worden. In tussentijd moet het staal in de koelkast bewaard worden (2-8įC). 

Terugbetaling:
Het opsporen van mutaties in MPL gen valt vanaf 1 november 2016 onder de RIZIV verstrekking 588512-588523, waarbij genafwijkingen door middel van een moleculair biologische methode worden opgespoord in de diagnostische investigatiefase van een chronische myeloproliferatieve neoplasie. Dit betekent dat binnen de diagnostiek van MPN, 2 testen (waaronder ook CALR en JAK2 mutaties) 1x per jaar kunnen worden aangerekend met een B-waarde van 3500 per test. 

 
Accreditatie Ja (Accreditatie volgens BELAC-certificaat 087-MED)
Validatiedossier Ja
Verantwoordelijke Apr. biol. B. Denys
   Laatste manuele bijwerking: BADE op 05/11/2019

Labogids www.uzgent.be/labgids